Diferentes Métodos de Siembra
- que es Sembrar: Es el acto
de colocar el material microbiologico en el medio de cultivo para promover su
crecimiento y desarrollo, y subsiguiente multiplicación.
El
resultado de una siembra se llama: Cultivo
·
Las
siembras pueden ser:
-
Primarias: cuando el
material es inoculado en los medios por primera vez
-
Secundarias: cuando
el material a inocular procede de una siembra primaria
Métodos :
1) Siembra por
dilución: Se toma el tubo
de ensayo con medio líquido, como el caldo simple. Se toma el material a diluir
y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada con el
material bacteriológico, se agita, con movimientos moderados.
Medio de
cultivo:
Liquido
Instrumento:
Asa
Finalidad: poner la
bacteria en suspensión
2) Siembra por
estrías en superficie: Se siembra el
material en la superficie de el agar inclinado en un tubo de
ensayo, allí se extiende por toda la superficie con el asa
, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar,
haciendo estrías no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la
parte más profunda de la superficie inclinada y se termina la
estría en la parte más cerca de la boca del tubo.
Medio de cultivo:
agar base inclinado
Instrumento: asa
3) Siembra por
estría por agotamiento: Con éste
procedimiento se puede conseguir una buena separación de las
colonias y aislarlas fácilmente. Para ello se funde el medio de cultivo, se
vuelca en caja de Petri y se deja solidificar. Con el asa previamente
esterilizada se toma material de un cultivo heterogéneo y se descarga sobre la
superficie del medio formando estrías. Esto puede realizarse de varias formas:
a- Al comienzo se
coloca el inoculo, luego se continúa con las estrías. Cuando se quiere obtener
colonias muy separadas se puede utilizar dos o tres placas de Petri, para lo
cual se repite la operación sin tomar con el asa nuevo material.
b- Se puede dividir
la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el material en el
primero, siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una estría luego
en el segundo, tercero y cuarto cuadrante sin cargar nuevamente el asa; en el
último cuadrante aparecerán las colonias aisladas
c- El inóculo se
extiende sobre una pequeña zona de la placa, próxima al borde, se esteriliza el
asa y se traza otra estría a partir del depósito y así
sucesivamente.
Medio de cultivo:
solido en placa de Petri
Instrumento.
Asa
Finalidad. Obtener
colonias aisladas
4)
Por picadura o punción: Con una asa en punta se toma el material que se quiere
sembrar y se lo introduce en el tubo, con medio semisólido. Introducir la asa en punta
hasta el fondo, formando un canal de punción, trayecto por el cual la
retiraremos luego. Este método se utiliza para estudiar la movilidad de las
bacterias.
Medio de cultivo.
Semisólido
Instrumento: asa en punta
Finalidad:
Estudiar la movilidad de las bacterias
5) Siembra en TSI:
(Por picadura y estrías en superficie): el TSI (Triple
Sugar Iron) es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa, hierro y un
indicador que es el rojo fenol.
En este medio
sembraremos por picadura y estrías en superficie, como ya conocemos, para
estudiar los cambios que ocurrirán en superficie y profundidad. A lo largo del
canal se desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la parte superior
o inferior del tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los azucares,
los cambios indican lo siguiente:
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